L'ovulazione è innescata dall'LH, l'ormone luteinizzante, la cui produzione da parte dell'ipofisi, una ghiandola che sta alla base del cervello, aumenta durante la fase follicolare, sotto la spinta degli estrogeni, e raggiunge il massimo poco prima dell'ovulazione: si tratta del cosiddetto picco dell'LH, che determina la rottura del follicolo ovarico e l'ovulazione.

La rottura del follicolo avviene in media 24-36 ore dopo l'inizio del picco di LH.

E' difficile accertare in modo inequivocabile la ovulazione. Non esistono test affidabili, non lo sono i dosaggi ormonali nè il monitoraggio ecografico della ovulazione.

Tuttavia, donne con cicli regolari (tra 26 e 36 giorni di intervallo), molto probabilmente ovulano più o meno regolarmente.

Un test correntemente usato per dimostrare la avvenuta ovulazione è il dosaggio del progesterone nella seconda fase del ciclo, circa una settimana prima dell'attesa mestruazione.